牡丹江医学院学报

2018, v.39;No.169(04) 1-3

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酵母ATG8与PMT1双基因缺失菌株的构建及鉴定
The construction and identification of ATG8 and PMT1 double-gene deficiency yeast strain

崔红晶;袁源;陈亚芹;邱堃佩;赵炜;

摘要(Abstract):

目的构建自噬相关ATG8与蛋白质O-甘露糖转移酶1(PMT1)双基因缺失酵母菌株。方法一步基因置换法构建ATG8基因缺失菌株(BY4741 atag8::LEU2);通过将不同配型的酵母细胞杂交、显微镜下四分体拆分,平板印记、缺陷型培养基筛选等方法,构建ATG8和PMT1双基因缺失菌株(BY4742 agt8::LEU2 PMT1::URA3);PCR鉴定阳性克隆基因组DNA。结果 ATG8基因缺失菌株电泳条带为2759 bp和980 bp,ATG8和PMT1双基因缺失菌株电泳条带分别为2759 bp,980bp,1630 bp和731 bp。四分体拆分实验发现ATG8基因缺失酵母细胞形成较小的单克隆。结论成功构建ATG8基因缺失菌株和ATG8与PMT1双基因缺失菌株;缺失ATG8基因酵母细胞形成较小的单克隆。

关键词(KeyWords): 酿酒酵母;自噬;甘露糖基化;复制性寿命

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金(31701050);; 广东省医学科学技术研究基金(A2016257);; 东莞市医疗卫生科技计划一般项目(2016105101289)

作者(Author): 崔红晶;袁源;陈亚芹;邱堃佩;赵炜;

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