牡丹江医学院学报

2018, v.39;No.166(01) 1-3+23

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酶连接介导PCR法构建酵母PMT3基因缺失菌株
Construction of yeast strain through enzyme ligation mediated PCR

崔红晶;周涛;宋浩昌;赵炜;刘新光;

摘要(Abstract):

目的本文运用酶连接介导的PCR法构建酿酒酵母PMT3基因缺失菌株。方法以酿酒酵母基因组DNA为模板,PCR扩增PMT3基因开放阅读框两侧片段,双酶切后,定向克隆于pRS305载体;限制性内切酶MluⅠ线性化基因缺失重组载体(pRS305-pmt3-ko),采用醋酸锂的方法将重组载体转化酵母细胞;经营养缺陷型培养基筛选,PCR法验证阳性克隆酵母菌株。结果基因缺失重组载体测序正确,PMT3基因缺失酵母菌株构建成功。结论利用基因缺失重组载体pRS305-pmt3-ko,成功构建PMT3基因缺失酵母菌株。

关键词(KeyWords): PCR;;酵母细胞;;载体;;分段克隆

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金(31701050,81671399);; 广东省医学科学技术研究基金(A2016257,B2014299);; 东莞市医疗卫生科技计划一般项目(2016105101289);; 东莞市国际科技合作(含港澳台)项目(201650812001)

作者(Author): 崔红晶;周涛;宋浩昌;赵炜;刘新光;

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