牡丹江医学院学报

2020, v.41;No.181(04) 7-9+22

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截短型潜态相关肽对TGF-β诱导HSC-T6细胞增殖的影响
Effect of Recombinant Truncated TGF-β Latent Associated Peptide on Proliferation of HSC-T6 cells

于洋;曹雅男;宋旭东;苏晓男;史嘉翊;吴丹;

摘要(Abstract):

目的原核表达并纯化重组截短型TGF-β潜态相关肽(latency associated peptide,LAP),观察其对转化生长因子TGF-β(Transforming Growth Factor-β,TGF-β)诱导的大鼠肝星状细胞(Hepatic stellate cell,HSC)增殖的影响。方法 LAP各个片段重组蛋白小量培养经IPTG诱导表达,并通过Ni~(2+)亲和层析纯化,纯化产物进行SDS-PAGE电泳检测。通过MTT法检测浓度分别为2μg/mL、4μg/mL、8μg/mL、16μg/mL、32μg/mL、64μg/mL LAP-B对TGF-β诱导的HSC-T6细胞增殖作用的影响。结果成功诱导表达可溶性截短型重组蛋白LAP-B,大量培养后经镍柱亲和纯化获得目的蛋白,经SDS-PAGE检测为LAP截短型重组蛋白。MTT检测LAP-B在2~64μg/mL浓度范围内能抑制TGF-β诱导的HSC-T6细胞的增殖,并随着LAP-B蛋白浓度增加HSC-T6细胞增殖抑制越显著。结论成功诱导表达及纯化截短型重组蛋白LAP-B,LAP-B抑制了TGF-β诱导的HSC-T6细胞的增殖,为后续研究LAP的抗肝纤维作用提供实验基础。

关键词(KeyWords): TGF-β潜态相关肽(LAP);原核表达;蛋白纯化;增殖

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 牡丹江市科学技术计划项目(Z2018s050);; 黑龙江省卫生计生委科研课题(2018501);; 牡丹江医学院研究生创新科研项目(2018YJSCX-10MY)

作者(Author): 于洋;曹雅男;宋旭东;苏晓男;史嘉翊;吴丹;

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DOI: 10.13799/j.cnki.mdjyxyxb.2020.04.002

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