牡丹江医学院学报

2020, v.41;No.180(03) 11-15

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过表达miR-22-3p抑制肝癌Li-7细胞增殖、迁移和上皮间质转化
Overexpression of miR-22-3p inhibits liver cancer Li-7 cell proliferation,migration,and epithelial-mesenchymal transition

刘长兵;胡惠贞;黄海良;

摘要(Abstract):

目的探讨miR-22-3p对肝癌Li-7细胞增殖、迁移及上皮间质化转变的影响。方法应用脂质体3000将miR-22-3p过表达质粒(GV251/miR-22-3p)转染至肝癌Li-7细胞,实验分别设置正常对照组(N)、阴性对照组(GV251/NC)和miR-22-3p过表达组(GV251/miR-22-3p)。应用浓度为200μg/mL G418筛选出miR-22-3p过表达稳转细胞株。CCK8实验检测细胞增殖能力变化;细胞划痕实验检测细胞迁移能力变化;Real-time PCR和Western blot检测Bcl-2和Bax的表达以及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关标志基因(E-cadherin、β-catenin、N-cadherin和Vimentin)mRNA和蛋白表达。结果与N组和GV251/NC组相比,GV251/miR-22-3p组miR-22-3p的表达显著升高(P<0.01),而且细胞的增殖和迁移能力在48h后均显著降低(P<0.01,P<0.01);与N组和GV251/NC组相比,GV251/miR-22-3p组Bcl-2的表达显著降低(P<0.01),Bax的表达则明显升高(P<0.01);同时,上皮标志基因E-cadherin和β-catenin则明显升高(P<0.01),间质标志基因N-cadherin和Vimentin在mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.01)。结论 miR-22-3p可通过抑制Bcl-2及促进Bax表达,进而降低肝癌Li-7细胞的增殖能力。同时,通过调控EMT相关基因的表达抑制EMT进程,进而降低肝癌Li-7细胞的迁移能力。

关键词(KeyWords): miR-22-3p;Li-7;EMT;增殖;迁移

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 安徽省高校自然科学研究重点项目(KJ2019A1284)

作者(Author): 刘长兵;胡惠贞;黄海良;

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DOI: 10.13799/j.cnki.mdjyxyxb.2020.03.003

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