人脐静脉内皮细胞的原代培养及体外层流体系的建立PRIMARY CULTURE OF ENDOTHELIAL CELLS DERIVED FROM UMBILICAL VEINS AND ESTABLISHMENT OF EXTRACORPOREALLAMINAR FOLW SYSTEM
宋宝辉,陈志鸿
摘要(Abstract):
目的:建立体外培养原代人脐静脉内皮细胞的方法及体外模拟自然生理剪切力条件下白细胞流动体系。方法:采用胶原酶、胰蛋白酶联合消化法培养人脐静脉内皮细胞,根据细胞生长特点、形态特征、免疫荧光对细胞进行鉴定,并通过体外层流体系观察白细胞和人脐静脉内皮细胞的相互作用。结果:种植在培养瓶中的内皮细胞4h贴壁生长, 4872h生长最快, 572h生长最快, 57d汇合。内皮细胞呈接触抑制生长、呈鹅卵石样外观,VWF相关抗原检测为阳性。人脐静脉内皮细胞经凝血酶刺激后,内皮细胞表面表达P-选择素并可以介导白细胞在其表面滚动。讨论:形态学及免疫学鉴定结果表明培养细胞为人脐静脉内皮细胞,体外层流体系的建立为以后研究工作奠定了基础。
关键词(KeyWords): 人脐静脉内皮细胞;VWF相关抗原;培养;选择素
基金项目(Foundation):
作者(Author): 宋宝辉,陈志鸿
DOI: 10.13799/j.cnki.mdjyxyxb.2005.02.001
参考文献(References):
- 1 VestweberD,BlanksJE.Mechanismsthatregulatethefunctionoftheselectinsandtheirligands.Physiol.Rev,1999,79(1):181~213
- 2 RainerTH.L-selectininhealthanddisease.Resuscitation,2002,52(2),127~141
- 3 TuLL,PoeJC,KadonoT, etal.AFunctionalRoleforCirculatingMouseL-SelectininRegulatingLeukocyteEndothelialCellInterac tionsInVivo.J.Immunol,2002,169:2034~2043
- 4 JaffeEA.Cultureofhumanendothelialcellderivedfromunbilicalveins.Identificationbymorphologicalcriteria.JCellBiol,1973,52:2745
- 5 余继海.人脐静脉内皮细胞的培养及鉴定.安徽医学[J],2003,24(5):4~6
- 6 何宏兵.人脐静脉内皮细胞体外培养20天左右是进行有关研究的较佳时期.中国病理生理杂志[J],1992,8(5):447