牡丹江医学院学报

2009, v.30;No.116(04) 5-8

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稳定表达nucleostemin-siRNA的肿瘤细胞克隆的筛选和鉴定
SCREENING AND APPRAISEMENT OF NUCLEOSTEMIN GENE SPECIFIC RNA IN HUMAN GASTRIC CARVINMA SGC-7901 CELL CLONES

郑学芝;周冬云;孙卫;念红;李丽;徐秋玲;

摘要(Abstract):

目的:用脂质体法建立nucleostemin(NS)基因特异性siRNA阳性细胞克隆,为深入研究NS基因在胃癌细胞增殖调控中的作用和机制提供理想的生物学模型。方法:试剂盒法将真核表达载体PCDNA4/C-NS-silencer质粒大量扩增,然后以限制性切酶PVUI酶切线性化处理,用LipofectamineTM2000 Reagent将PCDNA4/C-NS-silencer及其对照空载体转染胃癌SGC-7901细胞,经Zeocin抗生素压力筛选后用PCR方法鉴定细胞克隆外源基因整合阳性。结果:经Zeocin抗生素压力筛选后两组细胞均收获多个细胞克隆;PCR结果表明两组细胞克隆外源基因整合阳性。结论:成功建立表达NS-siRNA的胃癌SGC-7901细胞克隆。

关键词(KeyWords): nucleostemin(NS);胃癌;基因转染;细胞克隆

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 黑龙江省普通高等学校青年学术骨干支持计划项目(1153G047);; 黑龙江省卫生厅科研项目(2007-021);; 牡丹江医学院一般科研项目(B200822)

作者(Author): 郑学芝;周冬云;孙卫;念红;李丽;徐秋玲;

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DOI: 10.13799/j.cnki.mdjyxyxb.2009.04.049

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